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標題:
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發問:
Caspase-3-like activity was determined from cells first harvestedby the trypsin/EDTA method. Cells were washed in PBS, andcentrifuged at 10 000 g for 10 min at 4 ?C, before being lysed in200 μl of caspase lysis buffer {0.5% (w/v) CHAPS/1 mMPMSF/0.1 mM 1,10-phenanthroline in 10 ml of caspase buffer[50... 顯示更多 Caspase-3-like activity was determined from cells first harvested by the trypsin/EDTA method. Cells were washed in PBS, and centrifuged at 10 000 g for 10 min at 4 ?C, before being lysed in 200 μl of caspase lysis buffer {0.5% (w/v) CHAPS/1 mM PMSF/0.1 mM 1,10-phenanthroline in 10 ml of caspase buffer [50 mMTris/HCl (pH 7.4)/1 mMEDTA/10 mMEGTA]}. Lysed sampleswere centrifuged at 18 000 g for 10 min at 4 ?C to remove cell debris. Aliquots (50 μl) of each sample werewarmed to 37 ?C for 5 min with 1444 μl of caspase assay buffer [0.5% (w/v) CHAPS and 5 mM L-cysteine in assay buffer]. The fluorogenic substrate Ac-DEVD-AMC (acetyl-Asp-Glu-Val-Asp 7-amino-4- methylcoumarin; 10 mM in 100% DMSO) (6 μl) was added to each sample, and caspase-3-like activity was measured by the change in fluorescence (excitation and emission wavelengths of 380 and 460 nm respectively; slit width of 5 nm) over 1 h per mg of protein.
最佳解答:
Caspase 3 像活動是堅定的從細胞由trypsin/EDTA 方法首先收穫。細胞被洗滌了在PBS, 和被分離了在10 000 g 10 分鐘在4?C, 在被溶解在200 caspase 病勢漸退緩衝{0.5% (w/v) CHAPS/1 毫米PMSF/0.1 毫米1,10 二氮雜菲.l 之前在10 機器語言caspase 緩衝[ 50 mMTris/HCl (酸鹼度7.4)/1 mMEDTA/10 mMEGTA ]} 。被溶解的sampleswere 被分離在18 000 g 10 分鐘在4?C 取消細胞殘骸。整除數(50 .l) 各個樣品werewarmed 對37?C 5 分鐘以1444 年caspase 分析用試樣緩衝.l [ 0.5% (w/v) 破裂和5 毫米L 半胱氨酸在分析用試樣緩衝] 。fluorogenic 基體Ac DEVD Amc (acetyl Asp Glu Val Asp 7 氨基4 methylcoumarin; 10 毫米在100% DMSO) (6 .l) 增加了來各個樣品, 和caspase 3 像活動由變化測量了在熒光上(勵磁和放射波長380 和460 毫微米各自; 切開寬度5 毫微米) 1 h 每蛋白質鎂。
其他解答:
那是翻譯機好嗎= =" 沒人看的懂, 大大還說很棒....= "=|||||回答的人達的出來真的是太利害了 一定是英文高手
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